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文章已发表在SCI期刊 Chemical Engineering Journal（最 .新中科院SCI期刊分区：化学1区，IF 13.4 ），评论可以沾沾好运~

标题为: Establishment of human minor salivary gland organoids in laminin-GelMA hydrogel from healthy individuals and Sjögren’s disease patients




关键词：Human minor salivary gland；Organoids；Sjögren’s disease；Tofacitinib；laminin-GelMA hydrogel

摘要

位于口腔黏膜下方的人类小唾液腺（hMSGs）活检对于干燥综合征（Sjögren’s Disease, SjD）的明确临床诊断至关重要。尽管来自各种外分泌腺的类器官已被成功培养，但包含hMSGs多种细胞类型的类器官尚未成功培养。

在本研究中，我们成功建立了来自健康个体和SjD患者的hMSGs类器官的长期培养体系。这些类器官在人工层粘连蛋白-GelMA水凝胶中培养，无论是在体外受到神经递质刺激还是在体内移植后，都保留了天然腺体的表型和功能特征。

单细胞RNA测序显示，来自健康个体和SjD患者的类器官表现出独特的表型差异。此外，通过抑制JAK-STAT通路，托法替布促进了患者类器官的增殖，这表明其可能作为一种潜在的治疗策略进行进一步研究。

在此，我们从健康个体中提取类器官作为再生医学中的潜在移植材料，并开发了SjD hMSG类器官，用作探索SjD发病机制和开发治疗策略的疾病模型。

实验结果

图1 在特定培养基中建立hMSG类器官



图2 人工层粘连蛋白-GelMA水凝胶的特性及hMSG类器官在该水凝胶中的形成




图3 DAPT促进hMSG类器官在体外的结构和功能成熟


图4 hMSG类器官的原位移植及其再生潜能的评估



图5 非SjD类器官（ORG）和SjD类器官的培养过程、细胞异质性及腺体多样性



图6 单细胞RNA测序揭示非SjD类器官和SjD类器官的独特特征



图7 托法替尼通过PI3K/AKT信号通路提高SjD类器官的存活率




补充图1 hMSG类器官的培养与分析




补充图2 DAPT诱导成熟的hMSG类器官基因表达分析



补充图3 hMSG类器官体内移植



补充图4 hMSG类器官的簇特异性基因特征及富集分析



补充图5 hMSG类器官的簇特异性基因特征及富集分析（续）



补充图6 在Matrigel、GelMA和Laminin-GelMA水凝胶中培养的hMSG类器官



补充图7 hMSG或hMSG类器官的HE、免疫荧光及免疫组织化学染色

结论

总之，我们成功地从健康个体和干燥综合征（SjD）患者的人类小唾液腺（hMSG）中培养出了类器官。

当类器官在层粘连蛋白-GelMA（而非Matrigel）上培养时，其结构标志物、组织特异性表达、功能以及遗传稳定性在多代培养中均得以保持。单细胞RNA测序（scRNA-seq）揭示了非SjD和SjD类器官中的细胞多样性和组织特异性特征。

我们的研究结果表明，hMSG类器官可用于修复受损的小鼠唾液腺。此外，我们的结果还强调了SjD类器官在测试抗SjD药物中的应用价值，并表明托法替尼（tofacitinib）可能是治疗SjD的有潜力的候选药物，值得进一步研究其治疗潜力。

致谢及评价

本项目得到了中国国家自然科学基金（项目编号：81871588）的支持。我们感谢LetPub（www.letpub.com.cn）提供的语言协助和投稿前专家审阅服务。

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